組織固定液的制備方法,知道的人少之又少!
更新時(shí)間:2023-04-10 點(diǎn)擊次數:1854次
組織固定液是一種用于固定生物組織的液體,通常用于制備組織切片或制備組織樣本以進(jìn)行顯微鏡分析。常見(jiàn)的成分是甲醛和乙醇,它們可以固定細胞和組織中的蛋白質(zhì)和核酸,防止它們在處理和保存期間變性或降解。此外,其他成分也可能被添加到組織固定液中以達到特定的目的。
下面將對常用的組織固定液的制備方法進(jìn)行簡(jiǎn)要的分析:
1.甲醛固定液制備方法
甲醛固定液是常用的組織固定液之一。制備方法如下:
(1)將甲醛(37%)加入PBS緩沖液中,配制成4%的甲醛溶液;
(2)將甲醛溶液加熱至60℃,然后加入適量的PIPES(pH7.2)緩沖液并混合均勻;
(3)調整pH值至7.2,加入適量的氯化鈉和EDTA,混合均勻。
2.石蠟固定液制備方法
石蠟固定液適用于石蠟嵌入組織切片。它的制備方法如下:
(1)將甲醛、異丙醇和氯仿混合在一起;
(2)將混合液加入石蠟中,并用石蠟溶劑將其溶解;
(3)將組織樣品置于石蠟中,不斷震動(dòng)以充分浸泡,并在微波爐中進(jìn)行熱處理;
(4)將組織樣品懸浮在石蠟中,以便于切片和觀(guān)察。
3.乙醇固定液制備方法
乙醇固定液是另一種常用的組織固定液,其制備方法如下:
(1)用PBS緩沖液將70%乙醇稀釋為50%乙醇溶液;
(2)在肝素化管中滴加適量的50%乙醇溶液;
(3)將反應組織樣本放入管中,將其浸泡在50%乙醇液中,并用肝素化管封住。
總之,不同的固定液適用于不同類(lèi)型的生物試樣,并有不同的操作步驟。選擇合適的固定液并在正確的條件下操作是制備高質(zhì)量組織切片或組織樣本的關(guān)鍵。